shRNA. shRNA是可以克隆至表达载体并表达双链siRNA的RNA分子，包括两个短反向重复序列，中间由一茎环序列分隔，形成发夹结构，由polⅢ启动子控制。相对于siRNA，shRNA在细胞核中合成，进一步加工并运输到细胞质中，然后进入RISC发挥活性。

shRNA是一个单一的RNA分子，它自身折叠形成一个发夹结构。 像siRNA一样，它可以被设计成与特定的mRNA分子互补。 一旦shRNA被引入细胞，它就会被细胞机制处理成类似siRNA的分子，可以与目标mRNA结合并触发其降解，导致目标基因的表达减少

2021年9月17日 · （C）shRNA 构建用于插入表达载体(如慢病毒载体)。 两个在RNAi途径的基因沉默中具有实质利害关系的是双链小干扰RNA（siRNA）和基于载体的短发夹RNA（shRNA）。虽然siRNA和shRNA都可用于蛋白沉默，但它们的作用机制有所不同（图2）。

shRNA是short hairpin RNA，也是单连RNA，自身可以通过互补形成发卡结构。 shRNA是形成siRNA的前体，在细胞中形成后可以被DICER切割成10-20nt左右的siRNA。 siRNA和shRNA都可有通过转染试剂导入细胞，但是shRNA还可有通过质粒在细胞中表达。

2023年6月7日 · shRNA是一种人工合成的RNA分子，它有一个紧密的发夹状结构，可以通过RNA干扰（RNAi）的方式来沉默目标基因的表达。shRNA的原理是，它可以被细胞内的一种酶叫做Dicer切割成两条siRNA，然后siRNA和一种蛋白叫做RISC结合，形成一个复合物。

siRNA 和 shRNA 的结构. 结构上，siRNA 是21-23nt的双链RNA复合物，每条链的3’端有2-3个突出的非配对碱基，并且3’端为羟基，5’端为磷酸，这个结构具有能被Rnase Ⅲ样活性的核酸酶识别切割的特征，从而引发高度保守的Dicer 家族的RNaseⅢ的识别作用进而特异切割dsRNA产生基因沉 …

shrna在体内通常依靠rna聚合酶iii进行转录，常用人u6和人h1启动子驱动，据报道，在小鼠大脑中u6启动子驱动shrna的干扰效果比h1启动子更好。 1. 选择靶标： siRNA的作用范围可以是靶标基因mRNA的任何位置，一般推荐选择多个靶标， 选择靶标时要注意其特异性 。

如果使用shRNA慢病毒转染细胞以敲低目的基因的表达，在敲低的细胞内再次转染过表达的慢病毒，目的基因的表达量会增加吗？ 显示全部 关注者

2) 实现多个shRNA共表达：由于RNA 聚合酶II 可以启动较大的基因转录，因此多个shRNAmiRs可以作为 多顺反子 由单个启动子驱动表达。 3) 可与报告基因共表达： 将报告基因与shRNAmiRs作为多顺反子一起共表达，实现shRNA的转录监测。

以Cre on shRNA为例，该服务是使用FLEX(flip-excision)系统实现shRNA诱导表达。 FLEX是一种非常强大的控制基因表达的方法，它采用2对异质、反向的loxp位点(loxP和lox2272)，经过DNA翻转产生带有不同loxp位点的DNA翻转，防止进一步的DNA翻转，实现目标基因不可逆的翻转。