荧光显微镜rfp-gfp-lc3融合蛋白示踪自噬形成 使用双荧光自噬慢病毒感染细胞，加入自噬诱导剂后，根据红/绿荧光共定位情况，Merge后的亮黄色荧光点即为自噬体。

目前文献对自噬过程进行观察和检测常用的策略和手段有:通过western blot 检测LC3的剪切;通过电镜观测自噬体的形成;在荧光显微镜下采用GFP(-RFP)-LC3等融合蛋白来示踪自噬体形成以及降解。 近几年对自噬流的研究日趋增多,针对于此我们汉恒生物科技(上海)有限公司自主研发了用于实时监测自噬( 流)的mRFP-GFP-LC3 慢病毒,mRFP 用于标记及追踪LC3,GFP的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP 荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP …

pcmv-gfp-lc3b是碧云天自行研发的在哺乳动物细胞中表达gfp标签的人源lc3b 融合蛋白的质粒。 该质粒含有CMV启动子，为卡那霉素抗性，转染细胞后能够在靶细胞中高效表达绿色荧光蛋白GFP标签的LC3B的融合蛋白，呈现明亮的绿色荧光，可以用于细胞自噬(autophagy)的研究。

lc3全称map1lc3 ，贯穿整个自噬过程，是目前公认的自噬标记物。哺乳动物的lc3可分为三种：lc3a、lc3b和lc3c。其中，lc3b应用广泛。 lc3蛋白合成后被atg4剪切掉c端5肽，暴露甘氨酸残基，产生胞浆定位的lc3-i。

Ad-mCherry-GFP-LC3B是碧云天自行研发的重组腺病毒，感染后能够在靶细胞中有效表达红色荧光蛋白mCherry、绿色荧光蛋白(GFP)和LC3B的融合蛋白，呈现明亮的红色和绿色荧光，可以用于细胞自噬的检测。

Here, we explored the dynamic properties of the two types of FP-LC3-containing puncta using fluorescence microscopy techniques, including fluorescence recovery after photobleaching (FRAP) and fluorescence resonance energy transfer (FRET).

lc3 （自噬标志物） 是微管相关蛋白轻链3(map1lc3)的简称，它贯穿整个自噬过程，哺乳动物的lc3可分为三种：lc3a、lc3b和lc3c。自噬发生时，lc3 蛋白合成后立即在其羧基端被 atg4 所剪切，产生细胞浆定位的 lc3-i。

This chapter describes a cell-based high content green fluorescent protein (GFP)-LC3 assay using mouse embryonic fibroblasts (MEF) stably expressing GFP-LC3. Keywords: Autophagy; GFP-LC3 cell line; High-content assay.

In this chapter, we will detail step-by-step the GFP-LC3 reporter protocol we have adapted in our lab. This protocol begins with the generation of lentivirus expressing GFP-LC3. Then, the cells are transduced with titrated virus. After selecting the positive cells, single colonies are isolated, characterized, validated, and used in further study.

2011年6月2日 · A tandem fusion of mCherry and GFP is fused to LC3B (one of the several members of the mammalian LC3 family) to make a pH-sensitive sensor that is used to monitor autophagy in live cells. The GFP tag is acid-sensitive while the mCherry tag is acid-insensitive. The double tagged LC3 can be used to label autophagosomes, amphisomes and autolysosomes.