
Cre小鼠和flox小鼠区别以及Cre-LoxP系统 - 知乎 - 知乎专栏
flox小鼠,全称为flank-LoxP小鼠,是另一种常用的转基因小鼠模型,Flox小鼠是指在目的基因中含有成对的LoxP位点的小鼠。 它携带了一种特定的基因构建,该构建在其基因组中的特定位置插入了两个LoxP序列。 LoxP序列是一段长34bp的DNA序列,可以与CRE重组酶相互作用,是Cre重组酶识别的位点。 在CRE表达的组织或时间点,CRE重组酶识别和切割flox小鼠基因组中的LoxP序列,导致基因的重组,Flox小鼠的目的基因可以在与Cre小鼠交配后被敲除或敲入,从而实现基 …
文献中这些小鼠基因如flox/flox表达的是什么意思? - 知乎
lox指的是loxP序列,一段34bp的序列,可以被Cre重组酶(recombinase)识别,然后切上一刀。 最经典最常用的,就是Deletion这个情况:把loxP序列放在想要切掉的基因X两端,当Cre蛋白存在的时候,就过来欻欻切两刀,基因X就被切掉了。 比如你这个文章里,SM22启动子下表达的Cre蛋白,识别了Dbn基因两端的loxP,那Dbn基因就被切掉了,就成了Dbn-/-。 当然,更重要的是,Cre/lox系统一般都是条件性敲除。 条件性敲除指的是,只在特定细胞,或者特定器官里敲 …
【干货】Cre-loxP重组酶系统介绍 - 知乎 - 知乎专栏
Cre-loxP重组是一种特定位点的重组酶技术,可在DNA的特定位点上执行删除、插入、易位及倒位,用该系统可以针对特定的细胞类型或采用特定的外部刺激,对细胞中DNA进行修改。 在真核和原核系统中均适用。 1987年Brian Sauer博士报道了Cre-loxP重组系统可用在有丝分裂和非有丝分裂细胞中操作特定位点的特异性重组,最初用于激活哺乳动物细胞系的基因表达 [3-4]。 随后, Jamey Marth博士实验室的研究人员也证明了,Cre-Lox重组可以用在特定的转基因动物T细胞 …
flox/flox小鼠与KO小鼠有什么区别啊 - 丁香通研选
2022年8月8日 · flox的意思是 flanked loxP,意思是在目的基因片段的两侧各放一个loxP位点。 通常,这两个loxP位点同向排列,位于某一个外显子或者某几个连续的外显子两侧的内含子序列中。 如此,由于mRNA成熟时拼接掉内含子,插入内含子中的loxP是不影响基因正常表达的。 但是一但和携带Cre的小鼠品系交配,Cre蛋白表达的细胞中,Cre会识别两个loxP,并最终导致两个loxP位点之间的序列被删除。 如果loxP之间的这1个或几个外显子对应mRNA上的非3的整数倍的碱 …
条件性敲除小鼠的原理、构建与应用 - 知乎 - 知乎专栏
Cre-Lox基因重组系统是一种被广泛应用于特异性基因敲除、基因易位、基因翻转以及基因插入等操作的基因重组手段。 Cre重组酶 (cyclization recombination enzyme)最早于1981年在P1噬菌体中发现,该酶由343个氨基酸组成,除了拥有催化活性外,同时还可以识别特定序列: Loxp位点,该位点同样在P1噬菌体中被发现,序列长度为34bp [1]。 当目的基因序列两端插入相同方向的Loxp位点,同时有Cre重组酶存在时,Cre重组酶可将两个Loxp位点之间的DNA序列剪除并重 …
一文搞懂Cre-loxP条件性基因编辑 - 哔哩哔哩
2024年5月29日 · 噬菌体P1是一种感染大肠杆菌的病毒,其基因组中包含了一种名为Cre(Causes Recombination)的重组酶和特定的DNA序列loxP(Locus of crossing over (x) in P1)。 Cre酶是一个由343个氨基酸组成的38kDa蛋白。 loxP位点是一个34个碱基对长的DNA序列,由两个13个碱基对的反向重复序列 和一个8个碱基对的间隔序列组成。 Cre重组酶能够识别并结合loxP位点,诱导位于这两个位点之间的DNA重组。 这一发现最初是为了理解噬菌体在宿主细胞中如何复制 …
3.小鼠实验(条件性敲除,肝癌模型) - Zhejiang University
条件性基因敲除小鼠(也叫Flox小鼠)是指在目的基因中含有成对的loxp位点的小鼠,与Cre工具小鼠交配. 后可在特定的组织或细胞中敲除目的基因。 l CKO如何实现? 重组酶系统(如:Cre-loxP)介导的位点特异性重组技术。 Cre是重组酶(38kDa),可识别 34bp 长的 DNA 序列loxP。 loxP 两侧各 13bp 构成回文结构,中间 8bp....
获得条件性基因敲除小鼠后如何进行下一步繁殖?如何选择实验对 …
2018年3月7日 · 条件性基因敲除小鼠(也叫Flox 小鼠)是指在目的基因中含有成对的loxp 位点的小鼠,与Cre 工具小鼠交配后可在. 特定的组织或细胞中敲除目的基因。 若Flox 小鼠与广泛表 …
cre小鼠和flox小鼠关系概述 - GemPharmatech
Flox小鼠是指在目标基因两侧各放置一个loxP位点的小鼠。 当这些小鼠与表达Cre重组酶的小鼠交配时,Cre酶会识别并切除两个loxP位点之间的基因序列,从而实现特定基因的敲除。 以制备条件型敲除小鼠模型为例概述关系: 为实现某基因的条件型敲除,需要在目标基因 (或基因的部分重要片段)两侧插入方向相同的loxP位点,这种携带loxP位点但目标基因可以正常表达的小鼠称为“flox”小鼠。 要实现“条件型”敲除,还需Cre重组酶参与,通常是制作各种表达Cre重组酶的工具鼠,并 …
Efficient generation of mice carrying homozygous double-floxp alleles ...
2017年3月7日 · Here we demonstrate a simple and robust method of enhancing the HDR efficiency with no side effects detected. The newly developed system, termed the Cas9-Avidin-Biotin ssDNA (CAB) system, achieved...